06-599 acetyl-Histone H3抗体价格 益启供

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事项NAmiconQ&A

  Q: Amicon® Ultra超滤管的膜材质是什么?

  A: Amicon® Ultra超滤管的膜材质为默克密理博特有的 Ultracel® 再生纤维素膜，生产工艺严格，截留分子量明确而精细，蛋白吸附损失**小。

  Q: 如果要用超滤的方法分离两种蛋白，那么这两个蛋白的大小需要相差多少?

  A: 按照经验，我们推荐两个蛋白的分子量要相差一个数量级(10倍)。

  Q: Amicon® Ultra超滤管可以用于浓缩么?

  A: 可以。对于慢，我们推荐Amincon®Ultra 100kDa; 对于腺，推荐Amincon® Ultra 50kDa。具体的操作步骤，可以参考我们的浓缩纯化试剂盒FTLV00003和FTAV00003的产品使用说明书。另提供AAV(腺相关)的制备方法供参考。

  Q: Amicon® Ultrar超滤管可以用酒精消毒灭菌么?

  A: Amicon® Ultra与70%乙醇是兼容的，但是我们对灭菌处理的具体方法没有做相关的测试，所以无法提供更进一步的参考信息。

  Q: Amicon® Ultra超滤装置是否可以用于高压灭菌?

  A: Amicon® Ultra都是采用热封设计，不可以用高压高温灭菌。

  Q: Amicon® Ultra超滤管是否不含RNA酶?

  A: 我们不保证超滤管不包含RNA酶，建议您可以用0.1%DEPC在37度浸泡2小时，以完全灭活RNA酶C残留的DEPC可以用Milli-Q®超纯水洗涤除去。

  Q: 用Amicon® Ultra超滤管去除去污剂是有什么需要注意的吗?

  A: 去污剂因其独特的性质，当浓度大于临界微团浓度(Critical Micelle Concentration, CMC)时，去污剂分子会聚集形成微团分子而改变分子构象，这有可能会影响去污剂的去除效果，具体的操作步骤请垂询默克密理博技术支持专线400-889-1988-2分机。

  Q: 我的蛋白在浓缩时出现了沉淀为什么?

  A: 蛋白如果浓缩过快或者过度浓缩都有可能引起蛋白沉淀。我们建议蛋白浓缩后的**终浓度不超过20mg/ml。对于对浓缩速度敏感而容易沉淀的蛋白，我们建议的改进方法是：

  1)离心力降为推荐离心力的30%-50%

  2)改选择截留分子量更大的过滤装置(如原本选用10k，此时可以选择30k)

  3)在浓缩过程中取出超滤管，用***头反复吹吸几次

  Q: 浓缩后我发现浓缩液中没有目的蛋白，可能的原因是?

  A: 首先，Amicon® Ultra超滤管的比较低起始蛋白浓度为25ug/ml.请确保您的样本的起始浓度大于这个浓度。

  其次，如果问题仍然出现，请不要丢弃您的样本滤过液用以分析可能的原因：

  1)如果您的样本在滤过液中，那么请排查：

  a) 您是否选择了合适截留分子量的超滤管(目的蛋白分子量的1/2或者1/3)?

  b) 使用的离心力是否是在比较高范围内?如果您使用的是rpm，请换算成相应的g离心，具体换算方法请参考：

  https://www.msu.edu/~venkata1/gforce.htm

  c) 离心机**近是否有校准过?

  d) 您是否尝试这个蛋白?如果能确保你用同样的超滤管对其它蛋白成功操作的话，那么有可能是您的目的蛋白的原因。

  有时蛋白会因其本身的一些特性(构象差异)而影响浓缩效果，建议选用上一分子量级别的超滤管(如原本选用30k，此时可以选择10k)。

  2)如果您的样本也不在滤过液中：

  a) 您的样本起始蛋白浓度是否大于25ug/ml?

  b) 您用来确定样本浓度的方法是什么?是否可信?

  c) 您的目的蛋白是不是沉淀了?如果是，具体解决方法请参考上面的关于蛋白沉淀问题的解释。

  Q: 有时候我用超滤离心管连水都离不下来，可能是什么原因?

  A: Amicon® Ultra超滤膜中含有微量甘油。 如果出现这种情况，先用0.1N NaOH清洗再离心。***用缓冲液或Milli-Q®水再次清洗后甩干。清洗后的滤膜应立即使用，如暂时不用，请保持润湿状态，避免重新干燥。